首先通过三个HPLC的泵将氨基酸,氨基酸活化试剂HATU以及DIEA混合,由控制阀门来选择不同氨基酸种类以及活化试剂,接下来流经一条加热管路被活化,再流入到90度的装有树脂的玻璃注射器中进行反应连接和脱保护,在后面连接一个UV检测器检测流出的废液来监测反应效率。
本文分别对短肽,长链肽,比较难合成的肽,异构化的氨基酸连接以及UV检测效率等几个方面进行了比较验证,均发现其速度快,节省反应物,效率高误差低等优势。
和其它几种多肽合成法相比较,有以下几点优势:1.这种流水线式的,分别储存反应物再混合的形式可以快速连续合成。2,精准的泵和阀门自动控制减少人为误差等,更高效。3.对流动相的UV监测和数据收集可以相对的定量FMOC移除数量从而监测反应效率。4.让洗脱溶剂,脱保护试剂,激活的氨基酸保持高速流动,可以加速合成过程。
[1] Nature Chemical Biology volume 13, pages 464–466 (2017)